Hemiluminescentni imunoesej, CLIA je veoma osetljiva tehnika imunotestiranja.
1. Princip
Hemiluminiscentni imunotest kombinuje specifičnost imunološkog odgovora i visoku osjetljivost hemiluminiscencije. Njegov osnovni princip je kombinovanje specifičnog imunološkog odgovora između antigena i antitijela sa reakcijom hemiluminiscencije. Konkretno, antigen u uzorku koji se testira kombinuje se sa specifičnim antitelom kako bi se formirao imuni kompleks. Zatim, nizom hemijskih reakcija, imuni kompleks proizvodi hemiluminiscentni signal. Intenzitet luminescencije je proporcionalan koncentraciji antigena koji se testira, a sadržaj antigena koji se testira može se kvantitativno analizirati detekcijom intenziteta luminescencije.
2. Glavne komponente
Antitijela: uključujući antitijela za hvatanje i antitijela za otkrivanje. Antitijelo za hvatanje obično je fiksirano na čvrstom faznom nosaču kako bi uhvatilo antigen koji se testira. Antitelo za detekciju se kombinuje sa hemiluminiscentnim markerom da bi se otkrio antigen u imunološkom kompleksu.
Nosač čvrste faze: kao što su mikroploče, magnetne perle, itd., koji se koriste za fiksiranje zarobljenih antitijela kako bi se olakšala imunološka reakcija i odvajanje i pranje.
Hemiluminiscentni marker: obično supstanca koja može proizvesti luminiscentni signal u hemijskoj reakciji, kao što je luminol, akridinijum ester, itd. Marker se kombinuje sa antitelom za detekciju da bi proizveo hemiluminiscentni signal nakon imunološke reakcije.
Sistem detekcije: uključujući opremu kao što su detektori luminiscencije, koji se koriste za detekciju intenziteta hemiluminiscentnih signala i njihovo pretvaranje u čitljive vrijednosti.
3. Karakteristike
Visoka osjetljivost: Može otkriti ekstremno niske koncentracije ispitivane supstance, koja je obično nekoliko redova veličine osjetljivija od tradicionalnih metoda imunotestiranja.
Široki linearni raspon: Sadržaj ispitivane supstance može se precizno izmjeriti u širokom rasponu koncentracija bez višestrukih razrjeđivanja.
Jaka specifičnost: Na osnovu specifičnog vezivanja antigena i antitela, veoma je selektivan za specifične test supstance.
Brzo: Proces detekcije je relativno brz i rezultati se generalno mogu dobiti za kraće vreme.
Visok stepen automatizacije: Pogodan je za detekciju uzoraka velikih razmera i može se koristiti u kombinaciji sa automatizovanim instrumentima za poboljšanje efikasnosti detekcije.
4. Područja primjene
Klinička dijagnoza: Koristi se za otkrivanje različitih biomarkera, kao što su tumorski markeri, hormoni, markeri infektivnih bolesti, itd., kako bi se pružila važna osnova za dijagnozu bolesti, praćenje liječenja i procjenu prognoze.
Razvoj lijeka: Koristi se za praćenje koncentracije lijeka, procjenu efikasnosti i istraživanje metabolizma lijekova.
Ispitivanje sigurnosti hrane: Detekcija štetnih supstanci, ostataka pesticida, ostataka veterinarskih lijekova, itd. u hrani.
Monitoring životne sredine: Detekcija zagađivača i toksičnih materija u životnoj sredini.